《中国药典》(2015版(一部))中使用薄层色谱法(Thin-layer chromatography,TLC)对地骨皮的真伪对照鉴别,并没有记录其含量测定项目。
铬对脂质代谢至关重要。Lay等提出体内Cr(Ⅲ)酶促生成的铬酸盐可以用作磷酸酪氨酸磷酸酶(PTP)抑制剂,其作用机理与钒酸盐相似。
钴在人体内以维生素B12和辅酶形式发挥作用,通过VB12参与糖代谢和甲基转移,活性形式为5-脱氧腺苷钴胺和甲基钴胺,5-脱氧腺苷钴胺又称辅酶B12,参与甲基丙二酰辅酶A向琥珀酰辅酶A的转化,其代谢障碍会增加甲基丙二酸的产生。钼过量还可导致黄嘌呤氧化酶活性增强,尿酸增多,导致痛风症。LMWCr还能对蛋白酪氨酸磷酸酶1B进行抑制,进而抑制其对胰岛素信号转导的负调节。如涉及作品内容、版权等问题,请与本网联系相关链接:黄嘌呤,亚硝胺,酪氨酸,甲硫氨酸锌还影响人体生殖系统中多种酶的合成及活性,如男性缺锌会影响精子发生过程中各种酶的活性,从而影响生殖功能。
锌可以诱导超氧化物歧化酶(SODs)的辅助因子MT的产生,MT可以催化O2-向H2O2的转化,后者是OH的清除剂。3.人体必需微量元素锌与酶的关系锌与酶、蛋白质和信号转录因子的生物活性有关,参与体内各种平衡机制的维持,并作为多种酶的结构、调节和催化辅助因子,如组蛋白去乙酰化酶、DNA聚合酶、DNA连接酶等。温度达到70℃时酶活降为零。
菌株DTC03产-L-鼠李糖苷酶的热稳定性结果见图5如涉及作品内容、版权等问题,请与本网联系相关链接:芽孢菌,甘露醇,芽孢杆菌,柚皮苷。2.1.3菌株DTC03的生理生化特征菌株DTC03明胶液化试验、吲哚试验、葡萄糖、甘露醇试验均呈阳性,甲基红试验为阴性(表1)。革兰氏染色后发现菌株DTC03为长杆状的革兰氏阳性菌(图2b)。
声明:本文所用图片、文字来源《中国食品添加剂》,版权归原作者所有。目前国内外尚未有Bacillusvelezensis产-L-鼠李糖苷酶的相关报道。
选择与其亲缘关系较近的菌株进行比对,并使用MEGA7构建进化树,结果如图3所示,该菌是芽孢菌属,且与Bacillusvelezensis同源相似性最高。2.1.4菌株DTC03的16SrDNA扩增及分析将PCR扩增产物送到南京思普金生物科技有限公司测序,测得菌株DTC03的16SrDNA的序列为1392bp。筛选平板分四块区域点样后放入30℃培养箱倒置培养,7d后获得1株有明显透明圈菌株,如图1。2.结果与分析2.1产-L-鼠李糖苷酶海洋细菌的筛选与鉴定2.1.1产-L-鼠李糖苷酶菌株的筛选将富集培养的泥样梯度稀释后,涂布于添加柚皮苷的筛选培养基,30℃倒置培养,每天观察长出的菌落形态及透明圈出现情况。
根据菌落形态,菌体形态,初步判定菌株DTC03属于芽孢杆菌属。挑取初筛出现透明圈的菌落,分离纯化后挑取单菌落点样至筛选平板。2.1.2菌株DTC03的形态学特征观察平板中的菌落形态,其菌落呈白色,不透明,边缘不规则,表面粗糙的半球状菌落(图2a)。将序列与NCBI数据库进行对比,结果显示该菌株DTC03的16SrDNA序列与贝莱斯芽孢杆菌(Bacillusvelezensis)的16SrDNA序列相似度达99.93%。
结合形态和生理生化特征,将鉴定菌株DTC03为Bacillusvelezensis。芽孢染色表明该菌株DTC03可以产生芽孢(图2c)
2.1.2菌株DTC03的形态学特征观察平板中的菌落形态,其菌落呈白色,不透明,边缘不规则,表面粗糙的半球状菌落(图2a)。2.1.4菌株DTC03的16SrDNA扩增及分析将PCR扩增产物送到南京思普金生物科技有限公司测序,测得菌株DTC03的16SrDNA的序列为1392bp。
目前国内外尚未有Bacillusvelezensis产-L-鼠李糖苷酶的相关报道。挑取初筛出现透明圈的菌落,分离纯化后挑取单菌落点样至筛选平板。筛选平板分四块区域点样后放入30℃培养箱倒置培养,7d后获得1株有明显透明圈菌株,如图1。将序列与NCBI数据库进行对比,结果显示该菌株DTC03的16SrDNA序列与贝莱斯芽孢杆菌(Bacillusvelezensis)的16SrDNA序列相似度达99.93%。根据菌落形态,菌体形态,初步判定菌株DTC03属于芽孢杆菌属。如涉及作品内容、版权等问题,请与本网联系相关链接:芽孢菌,甘露醇,芽孢杆菌,柚皮苷。
选择与其亲缘关系较近的菌株进行比对,并使用MEGA7构建进化树,结果如图3所示,该菌是芽孢菌属,且与Bacillusvelezensis同源相似性最高。声明:本文所用图片、文字来源《中国食品添加剂》,版权归原作者所有。
2.1.3菌株DTC03的生理生化特征菌株DTC03明胶液化试验、吲哚试验、葡萄糖、甘露醇试验均呈阳性,甲基红试验为阴性(表1)。芽孢染色表明该菌株DTC03可以产生芽孢(图2c)。
革兰氏染色后发现菌株DTC03为长杆状的革兰氏阳性菌(图2b)。2.结果与分析2.1产-L-鼠李糖苷酶海洋细菌的筛选与鉴定2.1.1产-L-鼠李糖苷酶菌株的筛选将富集培养的泥样梯度稀释后,涂布于添加柚皮苷的筛选培养基,30℃倒置培养,每天观察长出的菌落形态及透明圈出现情况。
结合形态和生理生化特征,将鉴定菌株DTC03为Bacillusvelezensis本研究从海洋样品中筛选产-L-鼠李糖苷酶的细菌,并对菌株的酶学性质进行研究,为新颖-L一鼠李糖苷酶的开发及应用奠定实验基础。反应体系中的酶液沸水浴灭活15min作为对照。挑取产生透明圈的菌落在LB培养基上分离纯化。
化学法水解橙皮得到橙皮素单萄糖苷难以控制反应条件,产率低且易造成环境污染,无法进行大规模生产。使共难溶于水,散溶于甲醇,且几乎不溶于苯、丙桐和氯仿等有机溶剂,难以被人体吸收利用。
具有调节心血管系统、抗菌消炎、抗氧化、美白及机衰老等多种功能。橙皮苷是由两个单糖和一个更细个选按败其中的糖苷键,降低了橙皮育的浴解性。
94℃变性30s,54℃退火30s,72℃延伸90s,进行32个循环。取6支试管,各加入9mL陈海水,高压灭菌后冷却。
室温下,用pH4.0~9.0的缓冲溶液分别孵育酶液12h后,测定其剩余酶活力,并以未用缓冲液处理过的酶为对照,对照组酶活定义为100%。1.材料与方法1.1样品来源连云港市连云区海州湾高公岛海域海泥样品,置于冰盒,尽快带回进行试验。如涉及作品内容、版权等问题,请与本网联系相关链接:L-鼠李糖,磷酸氢二钠,橙皮苷,。-L-鼠李糖苷酶酶活力单位(U)的定义:在最适反应条件下,每分钟内催化1g底物(pNPR)转化为产物所需要的酶量,即为一个酶活力单位。
1.2主要设备及药品SW-CJ-1D单人超净工作台:苏州净化设备有限公司。生物酶解法是利用-L-鼠李糖苷酶(EC3.2.1.40)水解橙皮苷上的鼠李糖糖苷,得到橙皮素单葡萄糖苷,相比于化学法,生物法反应条件温和,且无污染,具有良好的应用前景。
1.4.5菌株DTCO3-L-鼠李糖苷酶酶学性质研究-L-鼠李糖苷酶的最适温度及热稳定性:试管中各加入170LpH6.5的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液和20L10mmol/LpNPR,分别在20℃、30℃、40℃、50℃、60℃、70℃下预热15min后加入10L酶液,反应20mim后,测定酶活,最高酶活性设为100%。CR22G高速离心机:株式会社日立制作所。
体系为:3.5LddH2O,0.5L上游引物,0.5L下游引物,0.5L模板,5Lpremix。橙皮苷脱掉一个鼠李糖后得到的产物为橙皮素单葡萄糖苷,它具有与橙皮苷相以的化学结构功能,但与橙皮苷相比,橙皮素单匍萄糖具有更的溶解性,生物利用率更高。